伊紅染色液

Eosin Staining Solution

●     產(chǎn)品組成：

● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

伊紅(Eosin)是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中解離成帶負(fù)電荷的陰離子，可以和蛋白質(zhì)氨基上帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合，可以使細(xì)胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色，而蘇木素染色液能將細(xì)胞核染成藍(lán)色，與紅色胞漿形成鮮明對(duì)比，從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中最廣泛使用的一種常規(guī)染色方法。

本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。

● 貯存：

RT避光保存，一年有效。

● 操作步驟：

1.  需要用戶自己準(zhǔn)備的試劑

a.  固定液： 4%多聚甲醛固定液。

b.  分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；

c.  如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無(wú)水乙醇；

d.  70%乙醇。

2.  樣品處理

a.  對(duì)于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

無(wú)水乙醇5分鐘。

90%乙醇2分鐘。

80%乙醇2分鐘。

70%乙醇2分鐘。

蒸餾水2分鐘。

b.  對(duì)于冰凍切片：

固定液固定10分鐘以上。

蒸餾水2分鐘。

c.  對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：

固定液固定10分鐘以上。

蒸餾水洗滌2分鐘。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。

3.  伊紅染色

對(duì)于上述處理好的樣品：

伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。 此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。

注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行伊紅染色。

4.  脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色

a.  脫水、透明、封片：

70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無(wú)水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。

用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察，細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。

b.  進(jìn)行其它染色：

如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后： 70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。 PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。 然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳，可能染料對(duì)抗體結(jié)合有影響，請(qǐng)單獨(dú)染色。