快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)印試劑盒
Rapid Semi-Dry Transfer Blot Kit Ver740158
貨號
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名稱
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規(guī)格
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RT5040
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快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)印試劑盒
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20次
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● 產(chǎn)品組成:
貨號
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名稱
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規(guī)格
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貯存
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RT5030
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5×RealBlot快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜緩沖液
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500 ml
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4℃
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SP1010
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半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)印濾布
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20張/包
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RT
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ML-NC-152045-5
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NC膜
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5張/包
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RT
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RTD6301
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麗春紅染色液
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100 ml
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RT
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說明書
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一份
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● 產(chǎn)品簡介:
快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)印試劑盒使用半干轉(zhuǎn)法(Semi-dry blot)方法,配套快速半干轉(zhuǎn)儀器能在10-15分鐘內(nèi)高效快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜(NC膜)上。
特點:
環(huán)境友好:快速轉(zhuǎn)膜液不使用甲醇,減輕了對實驗者和環(huán)境的傷害。
兼容性好:快速轉(zhuǎn)膜液能兼容Laemmli膠,預(yù)制膠,Bis-Tris膠等多種凝膠。
節(jié)省時間:快速轉(zhuǎn)膜液能在10-15分鐘內(nèi)完成蛋白的轉(zhuǎn)印。
以每次轉(zhuǎn)印使用200 ml 1×RealBlot快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜緩沖液計算,該產(chǎn)品可以至少使用20次。
● 貯存及運輸:
按照標(biāo)簽溫度貯存;有效期一年;常溫運輸。
● 使用說明:
1 按照下表配制1×RealBlot快速半干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜緩沖液:
加入順序
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組份
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1×快速轉(zhuǎn)膜液配制量 200ml
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1
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5×快速轉(zhuǎn)膜液
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40 ml
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2
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超純水
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120 ml
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3
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無水乙醇
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40 ml
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注:按照順序加入各種溶液。如果加入轉(zhuǎn)膜液后沒有用水沖洗稱量容器,加入乙醇會產(chǎn)生沉淀。
2 將濾布浸泡在1×快速轉(zhuǎn)膜液中,完全浸濕3-5分鐘。
3 根據(jù)凝膠大小將NC膜裁剪到凝膠近似大小,完全浸泡在轉(zhuǎn)膜緩沖液中。
4 將凝膠在超純水中浸泡漂洗2分鐘,去除膠表面的SDS。
5 按照順序做好轉(zhuǎn)印三明治結(jié)構(gòu):
1 負(fù)極(陰極)
2一張四層濾布
3 凝膠
4 轉(zhuǎn)印膜
5一張四層濾布
6 正極(陽極)
6 用滾輪趕出氣泡。
7 半干轉(zhuǎn)推薦使用恒流轉(zhuǎn)移:
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一塊小型膠(7.3×8.5 cm)
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兩塊小型膠(7.3×8.5 cm)或一塊中型膠(8.5×13.5 cm)
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1.5 mm厚度凝膠
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下列條件基礎(chǔ)上增加2分鐘
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下列條件基礎(chǔ)上增加2分鐘
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大于130 kD
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恒流1.3 A,15分鐘
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恒流2.5 A,15分鐘
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5-130 kD
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恒流1.3 A,10分鐘
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恒流2.5 A,10分鐘
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小于30 kD
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恒流1.3 A,7分鐘
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恒流2.5 A,7分鐘
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注:不同廠家半干轉(zhuǎn)儀器設(shè)置可能有所不同,請根據(jù)廠家說明書適當(dāng)調(diào)整。
8 轉(zhuǎn)膜效率檢測:
轉(zhuǎn)膜結(jié)束后,用蒸餾水漂洗NC膜,適量麗春紅染色液染色2-5分鐘,檢測轉(zhuǎn)膜效率。