PCR染料添加劑(10×)
● 儲(chǔ)存和運(yùn)輸:-20℃保存;常溫運(yùn)輸
● 貨號(hào):RTC3106
● 產(chǎn)品包裝:
5×1.5 ml
● 產(chǎn)品簡介
PCR染料添加劑為含有紅色染料和助沉劑的混合物,按照10倍體積稀釋于PCR反應(yīng)體系中,PCR結(jié)束后可以直接上樣電泳,不用再與loading buffer混合,方便快捷。特有的紅色染料不會(huì)影響Taq酶活性,電泳時(shí)指示前沿為紅色。
● 反應(yīng)舉例:
注意:以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)系統(tǒng),僅供參考。實(shí)際反應(yīng)條件因模板、引物等的結(jié)構(gòu)不同而各異,需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物長短等具體情況,設(shè)定最佳反應(yīng)條件。
以人基因組DNA為模板,擴(kuò)增1 kb的片段
1. 反應(yīng)體系的建立:50μl反應(yīng)體系如下(可根據(jù)比例放大或縮小反應(yīng)體系):
Template
|
<1mg
|
Primer 1(10 mM)
|
1 ml
|
Primer 2(10 mM)
|
1 ml
|
10×Taq Buffer
|
5 ml
|
dNTP
Mixture(10 mM)
|
1 ml
|
Taq (5 U/ml)
PCR染料添加劑(10×)
|
0.5 ml
5
μl
水至50μl
|
2.
PCR反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置:
94℃ 3 min
94℃ 30 sec
55℃30 sec 30
cycles
72℃ 1 min
72℃5 min
3.
結(jié)果檢測:反應(yīng)結(jié)束后取5μl反應(yīng)產(chǎn)物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
注:紅色指示染料電泳中的遷移速度略快于溴酚藍(lán)。