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非變性蛋白電泳Marker轉(zhuǎn)膜問(wèn)題
http://pipe-shield.com/news_detail.aspx?NewsID=248
高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker
II（45-669 kD）
High
Molecular Weight Native Electrophoresis Protein Marker II
● 產(chǎn)品編號(hào)及規(guī)格：
RTD6142 20次（100 μl）
● 儲(chǔ)存及運(yùn)輸條件：
-20℃貯存；常溫運(yùn)輸，開(kāi)封后有效期為12個(gè)月。
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本產(chǎn)品是5種蛋白質(zhì)混合物，分子量范圍為45-669kD，經(jīng)過(guò)非變性電泳后，用考馬斯亮藍(lán)染色后可以得到分布均勻密度相近的5條帶：
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蛋白名稱(chēng)
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分子量(kD)
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說(shuō)明
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pI
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Thyroglobulin
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669
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球蛋白
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4
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Ferritin
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440
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脫鐵后鐵蛋白單體
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5.3-5.8
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Recombinant
protein
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228
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昆蟲(chóng)球蛋白，單體分子量57 kD，非變性下為四聚體
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4.9-6.3
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BSA
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66
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球蛋白，單體分子量66 kD，非變性下可形成少量二聚體
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4.6-5.8
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Ovalbumin
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45
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球蛋白，分子量為45kD，非變性條件下大于45kD會(huì)出現(xiàn)電荷異構(gòu)體（charge isomer）
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4.71或4.59
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● 使用說(shuō)明：
1. 常溫融化后，徹底混勻，上樣電泳。
注：上樣量根據(jù)膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說(shuō)來(lái)，0.75mm×5mm（厚度×寬度）的加樣孔上樣5 μl，其他規(guī)格梳子請(qǐng)適當(dāng)調(diào)整上樣量。
2. 電泳結(jié)束后，染色，觀察結(jié)果。
注：使用銀染時(shí)，由于靈敏度高于考馬斯亮藍(lán)染色方法，可以適當(dāng)降低Marker上樣量，一般稀釋50倍。
注意：
1. 本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳（SDS-PAGE），因?yàn)樵?/span>SDS存在下，含有多個(gè)亞單位的蛋白會(huì)不同程度解聚。
2. 在非變性條件下，蛋白的遷移與蛋白的電荷、蛋白形狀以及蛋白分子量都有關(guān)。因此，在一種凝膠濃度下使用本Marker不能精確估計(jì)出目的蛋白的分子量。非變性電泳中，蛋白分子量的確定應(yīng)該是在不同凝膠濃度下，確定出蛋白的Rf值，繪制出凝膠濃度對(duì)Rf的曲線(xiàn)從而判定蛋白的分子量。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
8% Laemmli Native Gel（Cat:RTD6130）
1×TG 穩(wěn)壓150V 35-9 mA 85 min
lane 1，2 RTD6142 非變性蛋白Marker 5 μl
lane 3 BSA 2 μg
lane 4 Ovalbumin 2 μg
RTD6142 高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker II（45-669 kD）發(fā)表文章列表
1. [2021
IF=3.74] Cloning, expression, and function of
ferritins in the tick Haemaphysalis flava.
Product: RTD6142
高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker
II（45-669
kD）
Author: Yu Zhao, Lei Liu,
Jin-Bao Liu, Cong-Ying Wu, De-Yong Duan, Tian-Yin Cheng
Journal: Ticks
and Tick-borne Diseases. Volume 13, Issue 2, March 2022, 101892
Institution：College of Veterinary Medicine, Hunan
Agricultural University,
Paper link：https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1877959X21002454
2. [2021 IF=6.95] Characterizing
of a new α-agarase AgaE from Thalassomonas sp. LD5 and probing its catalytically
essential residues.
Product: RTD6142
高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker
II（45-669
kD）
Author: Jingnan
Xua, Zibo Cuia, Weibin Zhanga, Jingxuan Lua, Xinzhi Lua, Wengong Yu.
Journal: International
Journal of Biological Macromolecules. Vol
194,2022,50-57.
Institution： School
of Medicine and Pharmacy, Ocean University of China
Paper
link：https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2021.11.194
3. [IF=17.69
2021] Turn air-captured CO2 with methanol into amino acid and pyruvate
in an ATP/NAD(P)H- free chemoenzymatic system.
Product: RTD6130 非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒; PL111 5×非變性非還原蛋白上樣緩沖液; RTD6142 高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker II（45-669 kD）
Author: Jianming Liu, Han Zhang, Yingying Xu, HaoMeng, An-Ping Zeng.
Journal: Nature
Communications. 2023，14:2772.
Institution： Westlake University
Paper link： http://www.nature.com/articles/s41467-023-38490-w
4. [IF=3.8
2022] Characterization of Shy1, the Schizosaccharomyces pombe homolog of human SURF1.
Product: RTD6142 高分子量非變性電泳蛋白質(zhì)Marker II（45-669 kD）
Author: Ying Luo, Yuanqi Xu, Fawad Ahmad, Gang Feng?，Ying Huang.
Journal: Scientific Reports (2024) 14:21678.
Institution：School of Life Sciences, Nanjing Normal University
Paper link：https://doi.org/10.1038/s41598-024-72681-9
