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退火緩沖液(5×)

退火緩沖液(5×)

產(chǎn)品編號:RTE3105

產(chǎn)品規(guī)格:5×1ml

數(shù)量
價格 ¥200

DNA退火緩沖液(5×)

 

●     產(chǎn)品組成:

貨號

名稱

規(guī)格

貯存

RTE3105

DNA退火緩沖液(5×)

5×1ml

-20

保存:-20

產(chǎn)品簡介:

DNA寡核苷酸退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos)簡稱為DNA退火緩沖液,是一種可用于DNA oligo退火的緩沖液,可用于常規(guī)的DNA oligo的退火,尤其適合于較難退火的用于RNAi (也稱siRNA)質(zhì)粒構(gòu)建的DNA oligo的退火。該緩沖液能有效避免DNA oligo自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),并且兩條oligo退火后可以直接和經(jīng)酶切、純化的質(zhì)粒連接,轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆。

本試劑操作簡單,只需把待退火的DNA oligo和退火緩沖液按照一定比例混合后,置于PCR儀上進(jìn)行程序降溫,約90min即可完成。

操作步驟(僅供參考):

1、 把待退火的DNA oligo用經(jīng)滅菌水配制成50μM,同時徹底溶解退火緩沖液(5×)備用。

2、 按如下反應(yīng)體系操作:

順序

組份

體積

1

滅菌水

40μl

2

退火緩沖液(5×)

20μl

3

DNA oligo A(50μM)

20μl

4

DNA oligo B(50μM)

20μl

 

Total

100μl

按照上述順序,依次加入并混勻,如果所用PCR儀沒有加熱蓋,可加入Mineral Oil防止液體揮發(fā)。

3、 按如下PCR儀的退火條件:

步驟

溫度

時間

作用

1

95℃

2min

Oligo充分變性

2

90s下降1℃,降至25℃

90min

程序退火

3

-20℃

長期保存

暫時存放

注:如果使用的PCR儀無梯度降溫功能,也可以95℃處理后自然冷卻至常溫。


 
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