類囊體膜上樣緩沖液(10×)為類囊體膜提取試劑盒(貨號(hào):RTU5002)內(nèi)一組份,加入到增溶后的類囊體膜中,用于BN電泳。
將2.5 ml增溶緩沖液(2×)全部加入到增溶劑粉末中,加入滅菌水定容至5 ml,徹底混勻,即配成5 ml增溶緩沖液,適量分裝,-20℃貯存,盡量避免反復(fù)凍融。
1.9.1 取50 μl(濃度為1 mg Chl/ml)類囊體膜樣品, 4℃ 16000 g離心5分鐘,棄上清。
1.9.2 沉淀中加入50 μl類囊體膜增溶緩沖液重懸樣品(此時(shí)樣品濃度為1 mg Chl/ml),輕柔混勻,避免產(chǎn)生大量氣泡,冰浴10 min; 4℃ 16000 g離心15 min;上清為綠色,有微量沉淀。 注:如上清為無色,說明增溶不好。
1.9.3 取上清移至新管中(大約可以取到45 μl上清),加入1/10體積的類囊體膜上樣緩沖液,BN-PAGE 3-12%或4-16%梯度膠電泳(貨號(hào):RTD6139-0312或RTD6139-0416),上樣體積5-15 μl。