10×TBE

10×Tris-Borate-EDTA Solution

品名：10×TBE

簡(jiǎn)介：

TBE 即 Tris-Borate-EDTA buffer ，10×TBE是10 倍濃縮的 TBE，使用時(shí)需用蒸餾水稀釋 10倍后再使用，1×TBE工作液中組份濃度：89 mM Tris-borate，2 mM EDTA，pH8.0。

TAE與TBE的區(qū)別：

1. TAE更適合于跑大片段，大于13 kb的片斷用TAE分離效果好。TBE更適合于跑小片段，低于1 kb片段TBE效果更好。

2. TAE緩沖能力弱，需要經(jīng)常更換，長(zhǎng)時(shí)間電泳不可以選用。TBE有更強(qiáng)的緩沖能力，然而5×或10×TBE貯存容易出現(xiàn)沉淀。

3. 凝膠回收的話(huà)用TAE會(huì)更好，有文獻(xiàn)指出TBE中的硼酸影響回收效率，并且對(duì)回收后續(xù)連接反應(yīng)有抑制作用。

保存及效期：

RT保存。有效期1年。

緩沖液TAE與TBE，哪個(gè)更好？

TAE和TBE緩沖液都可以用于DNA的瓊脂糖凝膠電泳，兩者各有利弊，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況選擇不同的緩沖液。

1×TAE 成分：40 mmol/L Tris-乙酸；2 mmol/L EDTA。實(shí)驗(yàn)室一般配成50×TAE。

優(yōu)點(diǎn)：超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量，質(zhì)量電泳大于13 kb 的片段時(shí)分離效果好，可用于回收DNA片段。貯存液可以配成50×的高濃度，方便使用。

缺點(diǎn)：緩沖容量小，緩沖能力弱，長(zhǎng)時(shí)間電泳（如過(guò)夜）不可選用。

1×TBE成分：45 mmol/L Tris-硼酸；1 mmol/L EDTA。實(shí)驗(yàn)室一般配成5×或10×TBE。

優(yōu)點(diǎn)：緩沖能力強(qiáng)，適合較長(zhǎng)時(shí)間電泳，分辨率較高，電泳小于1kb的片段時(shí)分離效果好。

缺點(diǎn)：緩沖液中的硼酸成分會(huì)影響 DNA 回收效率以及后續(xù)的酶反應(yīng)實(shí)驗(yàn)；貯存液容易沉淀析出。

1. 電導(dǎo)率TBE＞TAE。因此相比于TAE，TBE不太會(huì)導(dǎo)致電泳槽內(nèi)過(guò)熱的情況發(fā)生，長(zhǎng)時(shí)間電泳推薦使用TBE

2. 硼酸是酶的抑制劑，因此如果你需要分離電泳的DNA用于酶切反應(yīng)，建議使用TAE作為電泳緩沖溶液

3. TBE對(duì)于較小片段的分離效果更好。對(duì)于小于300bp的片段，在2%的瓊脂糖凝膠上，TBE中的遷移速度更快

4. TAE適用于大片段的分離，大于2kb的片段在TAE中的遷移速度更快（0.8%的瓊脂糖凝膠中），速度比在TBE中快出約10%。當(dāng)片段大于13kb時(shí)，一般推薦使用TAE進(jìn)行電泳分離。

5. TAE更適用于回收DNA片段

6. 相比于TBE，TAE對(duì)于超螺旋的DNA分辨率更高