臺盼藍染色液（Trypan Blue Staining Solution）

●     產(chǎn)品組成：

● 產(chǎn)品簡介：

臺盼藍（Trypan Blue)或稱臺盼蘭、錐蟲藍，是細胞活性染料，常用于檢測細胞膜的完整性與細胞的存活率，是組織和細胞培養(yǎng)中最常用的死細胞鑒定染色方法之一。正常的活細胞細胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍，細胞不會被染成藍色；而喪失活性或細胞膜不完整的細胞可被臺盼藍染成藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬，故可用于巨噬細胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺盼藍拒染現(xiàn)象，因此臺盼藍溶液不能區(qū)分凋亡細胞和死亡細胞。臺盼藍染色后，通過顯微鏡下直接計數(shù)或顯微鏡下拍照后計數(shù)，就可以對細胞存活率進行比較精確的定量。染色時間只需 3-5 分鐘，操作簡單。

● 貯存：

4℃保存，一年有效。

● 操作步驟：

1.收集細胞：

對于貼壁細胞先用胰酶消化液消化細胞，用適量細胞重懸液（Hank’s液或生理鹽水）重懸細胞；對于懸浮細胞，1000-2000g離心1分鐘收集細胞，棄上清，用適量細胞重懸液重懸細胞。

2.臺盼藍染色：

吸取100微升重懸的細胞到1.5 ml離心管內(nèi)，加入100微升臺盼藍染色液，輕輕混勻，染色3分鐘  (染色3分鐘時間已經(jīng)足夠，但染色時間可以更長一些，但不宜超過10分鐘)。

3.計數(shù)：

  吸取少量經(jīng)過染色的細胞，用血細胞計數(shù)板計數(shù)。通常如果要比較精確地進行定量，每個細胞樣品至少數(shù)500個細胞，數(shù)出藍色細胞和細胞總數(shù)。

細胞存活率＝(細胞總數(shù)－藍色細胞數(shù))/細胞總數(shù)×100%

● 注意事項：

1. 染色時間不能太長，否則活細胞也會逐漸積累染料而染成顏色，使檢測結(jié)果偏低。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

實驗示例：

Jurkat細胞臺盼藍染色結(jié)果，深藍色細胞為死細胞