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1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)

1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)

產(chǎn)品編號(hào):TG190P

產(chǎn)品規(guī)格:10×1升

數(shù)量
價(jià)格 ¥300

1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)

●  產(chǎn)品組成:

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

TG190P

1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液(變性電泳,粉末型)

10×1L

 

說明書

一份

產(chǎn)品簡介:

本產(chǎn)品為即用型SDS-PAGE快速電泳緩沖液(Fast Running Buffer for SDS-PAGE),由Tris-Glycine電泳緩沖液優(yōu)化而來,適用于Tris-Glycine體系(Laemmli體系)蛋白凝膠電泳。與傳統(tǒng)的Tris-Glycine電泳緩沖液相比,使用本產(chǎn)品電泳時(shí)無需根據(jù)分離膠和濃縮膠調(diào)整不同電壓,可全程200-250 V恒壓電泳,約20-35 min可完成電泳,大大節(jié)約時(shí)間,并且對(duì)小分子蛋白分離效果更好,可使預(yù)染蛋白Marker中10 kD與15 kD條帶分離并清晰可見(凝膠濃度8%以上),達(dá)到快速高效分離蛋白的作用。

本產(chǎn)品為預(yù)混粉末,使用前需要用水配制溶解,但無需調(diào)節(jié)pH值,pH 8.0-8.5。

貯存和效期:

常溫貯存,常溫運(yùn)輸,有效期2年;配成溶液后,4℃貯存,有效期1-2周。

用前必讀:

1. 和傳統(tǒng)的SDS-PAGE電泳液(Laemmli系統(tǒng),1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液,25 mM Tris,192 mM Glycine,0.1% SDS,pH8.3)相比,本快速電泳液可以大幅加快電泳速度,縮短電泳時(shí)間。推薦150-200V恒壓電泳,通常20-35分鐘就能完成電泳。

2. 使用快速電泳緩沖液單板膠電泳時(shí),穩(wěn)壓200 V,起始電流在60-70 mA,如果同時(shí)電泳2板膠或者4板膠,電流會(huì)升高,請(qǐng)根據(jù)需求采取降溫措施。

3. 對(duì)于低濃度例如6%、8%或10%的固定濃度膠,本快速電泳液比傳統(tǒng)電泳液具有更好的分離效果,可以達(dá)到類似梯度膠的分離效果,更適合小分子量蛋白電泳。產(chǎn)生相同分離效果時(shí),使用本快速電泳液可使用濃度更低的分離膠,例如使用傳統(tǒng)電泳液對(duì)10%、12%或15%分離膠進(jìn)行電泳時(shí),使用本快速電泳液時(shí)對(duì)應(yīng)的分離膠只需要分別為6%、8%和10%,電泳效果基本一致。并且由于膠濃度較低,可以增強(qiáng)轉(zhuǎn)膜效率,提高WB檢測靈敏度。

不同蛋白大小選擇不同的分離膠濃度,參考下表:

Laemmli系統(tǒng)

SDS-PAGE分離膠濃度

最佳分離范圍(kD

1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液

最佳分離范圍(kD

1×Tris-Glycine-SDS電泳緩沖液

6%

25-300

50-350

8%

10-250

35-300

10%

5-150

20-150

12%

3-100

15-100

15%

低于60

10-80

4. 本快速電泳液含有SDS,適用于變性膠蛋白電泳,不適用于非變性電泳(Native-PAGE)。

5. 該快速電泳緩沖液建議用于經(jīng)典Laemmli系統(tǒng)配制的凝膠,經(jīng)測試可以達(dá)到最優(yōu)的分離效果。對(duì)于其他電泳系統(tǒng)如Bis-Tris系統(tǒng),HEPES系統(tǒng),Tris-醋酸系統(tǒng),Tricine系統(tǒng)等,需要經(jīng)過驗(yàn)證測試后使用。

6. 本快速電泳液可以適當(dāng)回收,回收后的電泳液可以作為外槽電泳液再使用1-2次。如果希望獲得最佳的電泳效果,請(qǐng)勿使用回收的電泳液。內(nèi)槽緩沖液每次都需要使用新鮮配制的電泳緩沖液。

使用說明:

1.  即用型1×SDS-PAGE快速電泳緩沖液配制:

1 L包裝的SDS-PAGE快速電泳液(粉末裝),倒入到燒杯中,加入超純水至總體積約為900 ml,漩渦攪拌溶解,定容到1 L并混勻,即配成即用型1×SDS-PAGE快速電泳液,溶液型緩沖液建議4℃貯存,可保存1-2周。

注:配制好的電泳液放置時(shí)間不宜超過兩周。如果出現(xiàn)變色或沉淀請(qǐng)重新配制新鮮的電泳液。

2.  電泳條件:

電壓建議為150-200V。一般情況下,恒壓200 V電泳時(shí),對(duì)于濃度為10%的分離膠僅需20-25分鐘即可完成電泳。如果需獲得更加平整和銳利的條帶,可以把電壓調(diào)整為100-150V,此時(shí)電泳時(shí)間需要適當(dāng)延長。

● 實(shí)驗(yàn)示例:






 
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