Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)
Anti-β-Actin Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
產(chǎn)品編號
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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RGA2030
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Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)
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20 μl
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● 產(chǎn)品簡介
來源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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β-Actin分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~45 kD
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注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
Actin抗體用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成β-actin N-terminal一段多肽作為抗原制備而成的抗β-actin小鼠單克隆抗體。本Actin抗體在Western blot或免疫染色時僅識別β-actin。注意:本抗體不能用于檢測成年動物心肌或骨骼肌的β-actin。
Actin即肌動蛋白,是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白,在細(xì)胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic、streaming和cytokinesis等過程中起重要作用。Actin大致可分為六種,其中四種是不同肌肉組織特異性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin;另外兩種廣泛分布于各種組織中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大于90%,但在N-terminal同源性僅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。
β-actin的蛋白水平通常不會發(fā)生改變,因此被廣泛用于WB時上樣量是否一致的參照,也常被用于免疫染色觀察細(xì)胞的微絲結(jié)構(gòu)。在用作WB的參照時,Actin抗體和Tubulin抗體的主要不同之處在于兩者所識別蛋白的分子量不同,這樣可以選擇合適的參照在同一張膜上實(shí)現(xiàn)同時檢測目標(biāo)蛋白和參照蛋白。
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
● 貯存形式:
2 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運(yùn)輸條件:
-20℃保存,一年有效;避免反復(fù)凍融;濕冰運(yùn)輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜交(ECL顯色):1:5000-10000稀釋,常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗(yàn)示例:
樣品:K562細(xì)胞,SDS裂解液(貨號:RL1060)提取總蛋白;
電泳:RTD6117 4-20% RealPAGE預(yù)制膠
轉(zhuǎn)膜:NC膜,1×RealBlot快速轉(zhuǎn)膜液快轉(zhuǎn)400 mA 30 min
封閉:Western封閉液I(BSA)封閉60min
一抗:Anti-β-Actin抗體(鼠單抗)(貨號:RGA2030)
1:10000 RT 60min;
二抗:HRP標(biāo)記羊抗鼠IgG(貨號:HGM1060) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發(fā)光液(貨號:EC2520)自動曝光1秒